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這樣操作腫瘤解離試劑盒,即簡單又快速
更新時間:2021-08-26 瀏覽次數:734
腫瘤解離試劑盒具有高效、快捷、易批量操作等優點,不同的廠家提供不同種類,不同類型的腫瘤解離試劑盒產品,為科研用戶帶來方便。
實驗前的準備工作:
1、準備好所有實驗額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等;
2、確定試劑盒在有效期內;
3、仔細閱讀說明書;
4、按說明書確定所有試劑齊全;
5、標本制備要規范,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備,盡量分裝做備份;
6、根據檢測標本數量確定所需試劑的量;
7、按說明書將所用試劑盒平衡至室溫,配制所需試劑。
腫瘤解離試劑盒的操作步驟:
1、使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差;
2、根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內;
3、加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時;
4、甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次;
5、每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘;
6、甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次;
7、每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照;
8、取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果;
9、在450nm波長處測定各孔的OD值。
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